亦稱礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，最適條件下培養(yǎng)至菌種長出健壯菌落后注入滅菌的液體石蠟，使其覆蓋整個斜面，再直立放置于低溫（4～6℃）干燥處進(jìn)行保存的一種菌種保藏方法。

操作步驟如下：
1 液體石蠟的準(zhǔn)備
選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌：
121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無菌檢查后備用。
160℃干熱滅菌2個小時，冷卻后，經(jīng)無菌檢查后備用。

2 斜面培養(yǎng)物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件下注入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上，液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏
4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時間2～10年。
4.2　保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時補(bǔ)充無菌的液體石蠟。

5 恢復(fù)培養(yǎng)   恢復(fù)培養(yǎng)時，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。