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弓形蟲病實驗室診斷與結(jié)果分析

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-09-22  來源:實驗室資訊網(wǎng)
核心提示:弓形蟲病(toxoplasma)是由剛地弓形蟲引起的人畜共患的傳染病,具有廣泛的自然疫源性,很多哺乳動物和鳥類均可罹患此病。弓形蟲
 弓形蟲病(toxoplasma)是由剛地弓形蟲引起的人畜共患的傳染病,具有廣泛的自然疫源性,很多哺乳動物和鳥類均可罹患此病。弓形蟲侵襲人體可導(dǎo)致弓形蟲感染和弓形蟲病,后者專指有臨床表現(xiàn)和活動性感染的病理學(xué)改變。人體弓形蟲感染多為隱性感染,但抵抗力低下時,則可出現(xiàn)嚴重的臨床癥狀。先天性感染常致胎兒畸形、死胎及流產(chǎn)。
[病因?qū)W] 弓形蟲生活史包括有性生殖和無性生殖2個階段,全過程需兩種宿主——終末宿主(貓及貓科動物)和中間宿主(其他動物或人體內(nèi))。弓形蟲發(fā)育全過程有5種不同形態(tài):即滋養(yǎng)體、包囊、裂殖體、配子體和卵囊。
貓食人弓形體卵囊或包囊后,在腸腔分別釋放出子孢子和滋養(yǎng)體,并侵入小腸上皮細胞進行裂體增殖,部分裂殖子發(fā)育為雌雄配子體,兩者結(jié)合為合子,發(fā)育為卵囊,隨貓糞排出體外。
人食人弓形體卵囊或吞食包囊后,在腸內(nèi)逸出子孢子、緩殖子或速殖子,隨即侵入腸壁經(jīng)血或淋巴進入單核吞噬細胞系統(tǒng)寄生,并擴散至全身各器官組織的實質(zhì)細胞內(nèi)繁殖,導(dǎo)致細胞破裂,引起各種急性病癥。在免疫功能正常的機體,部分速殖子侵入宿主細胞后,特別是腦、眼、骨骼肌的蟲體繁殖速度減慢,并形成包囊,包囊在宿主體內(nèi)可存活數(shù)月、數(shù)年,甚至終身不等。當機體免疫功能低下或長期應(yīng)用免疫抑制藥時,組織內(nèi)的包囊可破裂,釋出緩殖子,進入血流和其他新的組織細胞繼續(xù)發(fā)育繁殖。
速殖子期是弓形蟲的主要致病階段,以其對宿主細胞的侵襲力和在有核細胞內(nèi)獨特的內(nèi)二芽殖法增殖破壞宿主細胞。蟲體逸出后又重新侵入新的細胞,刺激淋巴細胞、巨噬細胞的浸潤,導(dǎo)致組織的急性炎癥和壞死。
包囊內(nèi)緩殖于是引起慢性感染的主要形式,包囊因緩殖子增殖而體積增大,擠壓器官,使功能受到障礙。包囊增大到一定程度,可因多種因素而破裂。游離的蟲體可刺激機體產(chǎn)生遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng),并形成肉芽腫病變,后期的纖維鈣化灶多見于腦、眼部等。宿主感染弓形蟲后,在正常情況下,可產(chǎn)生有效的保護性免疫,多數(shù)無明顯癥狀,當宿主有免疫缺陷或免疫功能低下時才引起弓形蟲病,即使在隱性感染,也可導(dǎo)致復(fù)發(fā)或致死的播散性感染;近幾年有報道艾滋病患者因患弓形蟲腦炎而致死。
[實驗室診斷]
特異性檢查
(1)涂片檢查。
(2)動物接種分離法。
(3)血清學(xué)檢查。
(4)分子生物學(xué)診斷。
[結(jié)果分析與判斷]
1.涂片檢查 取急性期患者的體液、腦脊液、血液、骨髓、羊水、胸水經(jīng)離心后,沉淀物作涂片,或采用活組織穿刺物涂片,經(jīng)姬姆薩染色后,顯微鏡下檢查出弓形蟲滋養(yǎng)體即可確診。此法簡便,但陽性率不高、易漏檢。此外也可切片用免疫酶或熒光染色法,觀察特異性反應(yīng),可提高蟲體的檢出率。
2.動物接種分離法 動物接種分離法或細胞培養(yǎng)法查找滋養(yǎng)體。采用敏感的實驗動物小白鼠,樣本接種于腹腔內(nèi),1周后剖殺取腹腔液顯微鏡檢查,陰性需盲目傳代至少3次;樣本亦可接種于離體培養(yǎng)的單層有核細胞。動物接種和細胞培養(yǎng)是目前常用的病原查診方法。
3.血清學(xué)檢查 由于弓形蟲病原學(xué)檢查存在不足,血清學(xué)檢查成為廣泛應(yīng)用的診斷手段。方法種類較多,主要有以下4種。
(1)染色試驗:為經(jīng)典的特異血清學(xué)方法,采用活滋養(yǎng)體在有致活因子的參與下與樣本內(nèi)特異性抗體作用,使蟲體表膜破壞不為著色劑美藍所染。顯微鏡檢查見蟲體不被藍染者為陽性,蟲體多數(shù)被藍染者為陰性。
(2)IHA:此法特異、靈敏、簡易,適用于流行病學(xué)調(diào)查及篩查性抗體檢測,應(yīng)用廣泛。
(3)間接免疫熒光抗體試驗:以整蟲為抗原,采用熒光標記的第2抗體檢測特異抗體。此法可測同型及亞型抗體,其中檢測IgM適用于臨床早期診斷。
(4)ELISA:用于檢測宿主的特異循環(huán)抗體或抗原,已有多種改良廣泛用于早期急性感染和先天性弓形蟲病的診查,這種方法的靈敏度可檢出抗原量為0.5ug/L
4.分子生物學(xué)診斷 近年來將PCR及DNA探針技術(shù)應(yīng)用于檢測弓形蟲感染,更具有靈敏、特異、早期診斷的意義,目前已開始試用于臨床。
弓形蟲病的臨床表現(xiàn)多種多樣,且易與許多疾病混淆,鑒別診斷很關(guān)鍵。先天性弓形蟲感染必須與風疹、巨細胞病毒感染、單純性皰疹病毒相區(qū)別。
 
編輯:songjiajie2010

 
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