2012年8月媒體報道，某檢測中心對國內三家葡萄酒上市公司的十款葡萄酒進行檢測后發現農藥多菌靈、甲霜靈超標，這兩種農藥均對人體存在致癌風險。消息一經報道，又一次引起了人們對農藥殘留的關注，多菌靈、甲霜靈的檢測成為檢測機構關注熱點。查閱已發表文章中關于農藥殘留的檢測方法，發現大量文獻報道使用AB SCIEX公司儀器檢測食品中農藥殘留[1]，參考文獻報道方法建立關于多菌靈和甲霜靈的LC-MS/MS檢測方法。

為了更有效檢測和監控多菌靈和甲霜靈殘留，需對上述兩種殺菌劑同時進行檢測。AB SCIEX公司一直致力于為用戶提供全方位的解決方案，包含 iDQuant™ 農殘篩查標樣試劑包（見圖1左圖），試劑包含兩百余種農藥標準溶液，除此之外整體方案還提供成熟的適用于多種基體樣品中農藥殘留 iMethod™ 測試方法包[2]（見圖1右圖），供廣大檢測機構選擇。以下列出在葡萄酒中上述兩種農藥的檢測的詳細實驗方法。
     

圖1 AB SCIEX公司整體解決方案
 

1.樣品前處理方法

稱取10.0 g樣品于50 mL燒杯中，加入20 mL水溶液，稀釋混勻，待凈化。

依次用3.0mL的正已烷+乙酸乙酯（1+1），3.0mL去離子水活化HLB 小柱，待凈化的樣品6.0mL加至SPE凈化柱，萃取過程需要在負壓條件下進行，最后用6.0mL的去離子水洗滌提取容器，一并過柱，抽真空2 min，將小柱抽干；同時準備活化氨基－硫酸鎂小柱，在LC- NH2氨基小柱中裝入1/3高度的無水硫酸鎂，用5 mL正已烷+乙酸乙酯（1+1）活化氨基－硫酸鎂小柱，最后保持填料上剩余0.5 mL正已烷+乙酸乙酯（1+1）活化溶液；由上而下將HLB 小柱（上）NH2小柱（下）進行串聯，用15 mL正已烷+乙酸乙酯（1+1）分三次對串聯小柱進行洗脫，并且洗脫開始時需要負壓抽真空，以便洗脫進行，收集全部洗脫液于15 mL玻璃刻度試管，置于40 ℃下氮吹干，用甲醇:水為5:95溶解殘渣，定容至1.0 mL，取上層清液供LC/MS/MS分析。

2.LC-MS/MS儀器條件

(1)  液相色譜參數：

色譜柱： Phenomenex Synergi Fusion-RP 2.0X50mm，4um

流動相：A：水（含5mM 甲酸銨）                       B：甲醇（含5mM 甲酸銨）

柱溫：30℃，流速：250μl/min；

流動相：A：水（5mM乙酸銨），B：甲醇（5mM乙酸銨）；

梯度洗脫，洗脫條件見表1：

表1液相色譜條件

Time(min)	Flow Rate (μL/min)	A(%)	B(%)
0	250	95	5
5	250	50	50
12	250	10	90
14	250	10	90
16	250	95	5
17	250	95	5

(2)  質譜條件參數：

離子源： Turbo V™   離子源；

掃描模式：正離子

采集模式：多反應監測MRM

表2 多菌靈和甲霜靈的離子對及參數信息表

編號	英文名	中文名	Q1	Q3	RT (min)
1	Carbendazim	多菌靈	192.2	160.1* 132.2	7.8
2	Metalaxyl	甲霜靈	280.2	220.2* 192.2	10.2

注：帶*為定量離子對；

以上質譜參數適用于AB SCIEX公司API TripleQuad 3200/4000/4500/5000/5500/6500以及QTRAP 3200/4000/4500/5500/6500型號儀器；

實驗結果

多菌靈和甲霜靈總離子譜圖如下：

結論

AB SCIEX提供的全方位解決方案，可同時測定葡萄酒中多菌靈和甲霜靈。

參考文獻

[1] Kaushik Banerjee, Dasharath P. Oulkar, Soma Dasgupta. Validation and uncertainty analysis of a multi-residue method for pesticides in grapes using ethyl acetate extraction and liquid chromatography–tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2007,1173: 98–109

[2] AB SCIEX官方網站有關食品及飲料殘留檢測方法的網頁：http://www.absciex.com.cn/products/methods/imethod-tests-for-food-and-beverage