1．翻倍時(shí)間（Doubling Time）

細(xì)胞的翻倍時(shí)間在評(píng)價(jià)昆蟲細(xì)胞健康程度的參數(shù)中是最容易測(cè)量的。翻倍時(shí)間應(yīng)該在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)期復(fù)制時(shí)測(cè)量，對(duì)于Sf9和Sf21細(xì)胞來(lái)說(shuō)通常是介于16-24小時(shí)之間，不過(guò)大多數(shù)在20-22小時(shí)。

dt=t×ln2/ln(Ct/Co)，其中dt為翻倍時(shí)間，Co為起始細(xì)胞數(shù)目，Ct為經(jīng)過(guò)時(shí)間t后的細(xì)胞數(shù)目，t為Co和Ct兩次計(jì)數(shù)之間的間隔時(shí)間，所有的時(shí)間都以小時(shí)為單位。

2．細(xì)胞大小（Cell Size）

細(xì)胞的大小是監(jiān)測(cè)細(xì)胞健康程度的一個(gè)非常有用的參數(shù)。如果細(xì)胞是健康的，細(xì)胞的大小均一，都處于該細(xì)胞株體積正常變化范圍的下限。細(xì)胞的大小在不同的細(xì)胞株變化是很大的。對(duì)于我用過(guò)的Sf9和Sf21，典型的直徑是16-18mm，不過(guò)我知道有些細(xì)胞株小至14 mm或者大至19 mm仍然很健康。

3．滯后期（Duration of Lag）

當(dāng)細(xì)胞的密度較低時(shí)，會(huì)有一個(gè)滯后期，其長(zhǎng)短取決于分裝或者傳代后細(xì)胞的密度。一般說(shuō)來(lái)，該密度越低，滯后期越長(zhǎng)。對(duì)于一個(gè)特定的細(xì)胞株來(lái)說(shuō)，當(dāng)這個(gè)密度高出一個(gè)閾值時(shí)，滯后期的長(zhǎng)短與密度無(wú)關(guān)；而低于一個(gè)閾值時(shí)，滯后期無(wú)限長(zhǎng)，細(xì)胞不再增殖。

4．低密度分裝極限（Low Density Split Tolerance）

能夠在一個(gè)較短的滯后期（小于12小時(shí)）復(fù)蘇的細(xì)胞形狀較好。不過(guò)這是細(xì)胞株的特性，需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來(lái)確定你的細(xì)胞株的密度極限。我的細(xì)胞株有些在分裝成密度為5×104細(xì)胞/ml時(shí)仍然可以很好復(fù)蘇，有些細(xì)胞株分裝成5×105細(xì)胞/ml就不能復(fù)蘇了。

5．高密度極限（High Density Maximum）

這是你的細(xì)胞能生長(zhǎng)的最大密度，高于這個(gè)密度你的細(xì)胞將進(jìn)入平臺(tái)期。這個(gè)指標(biāo)既和細(xì)胞株有關(guān)，又和使用的培養(yǎng)液有關(guān)。我建議先把你的細(xì)胞株培養(yǎng)至平臺(tái)期，然后把一些分裝到新鮮的培養(yǎng)液中以后，使剩下的繼續(xù)生長(zhǎng)至平臺(tái)期，同時(shí)密切監(jiān)測(cè)細(xì)胞狀況。一般來(lái)說(shuō)，細(xì)胞的培養(yǎng)要避免密度超過(guò)高密度極限的80%。對(duì)于我培養(yǎng)的細(xì)胞，這個(gè)極限值從2×106至12×106細(xì)胞/ml不等。