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HPLC常見問題

放大字體  縮小字體 發布日期:2005-11-18
核心提示:1 . HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 樣品量不足:解決辦法為增加樣品量 樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流
1 . HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法
樣品量不足:解決辦法為增加樣品量
樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子
樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器
檢測器衰減太多:調整衰減即可。
檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數
檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。
檢測池中有氣泡:解決辦法為排氣。
記錄儀測壓范圍不當:調整電壓范圍即可。
流動相流量不合適:調整流速即可。
檢測器與記錄儀超出校正曲線:解決辦法為檢查記錄儀與檢測器,重作校正曲線。
2 . 做 HPLC 分析時,柱壓不穩定,原因何在? 如何解決?
原因可能有: ?

泵內有空氣,解決的辦法是清除泵內空氣,對溶劑進行脫氣處理;
比例閥失效,更換比例閥即可。
泵密封墊損壞,更換密封墊即可。
溶劑中的氣泡,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時改變脫氣方法;
系統檢漏,找出漏點,密封即可。
梯度洗脫,這時壓力波動是正常的。
3 .我購買的 HPLC 柱驗收測試時柱壓過高,請問為什么?
柱壓過高是 HPLC 柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因。

拆去保護柱,看柱壓是否還高,否則是保護柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;
把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查。
將柱子的進出口反過來接在儀器上,用 10 倍柱體積的流動相沖洗柱子, ( 此時不要連接檢測器,以防固體顆粒進入流動性 ) 。這時,如果柱壓仍不下降,再檢查;
更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質,正是這些雜質將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請與廠商聯系。一般情況下,在進樣器與保護柱之間接一個在線過濾器便可避免柱壓過高的問題, SGE 提供的 Rheodyne 7315 型過濾器就是解決這一問題的最佳選擇。
4 .液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么?
篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
存在干擾峰,解決辦法為使用較長柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子。

 

 

編輯:songjiajie2010

 
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