考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(常規(guī)法)
簡(jiǎn)介：
本考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(Commassie Blue Staining Kit)采用了最經(jīng)典的考馬斯亮藍(lán)染色和脫色方法，以考馬斯亮藍(lán)
R250為染料，可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的常規(guī)染色和脫色，或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢
測(cè)。
使用本試劑盒，采用常規(guī)染色脫色方法累計(jì)時(shí)間達(dá)到2-3小時(shí)后可以觀察到蛋白條帶；采用快速染色脫色方法20分鐘左右
即可觀察到蛋白條帶。觀察到最清晰的蛋白條帶則需染色脫色更長(zhǎng)時(shí)間。
本試劑盒中的染色液和脫色液經(jīng)過改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性氣味的乙酸。
保存條件：
室溫保存，至少一年有效。
注意事項(xiàng)：
可以使用槍頭盒或適當(dāng)大小的培養(yǎng)皿作為染色和脫色的容器。
本染色液呈酸性，有輕微腐蝕性，使用時(shí)請(qǐng)作必要防護(hù)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. 常規(guī)染色脫色方法：
a. 電泳結(jié)束后，取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
b. 置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)，室溫染色1小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間。
注：具體的染色時(shí)間取決于凝膠的厚度和染色時(shí)的溫度。凝膠較厚，溫度較低，則染色時(shí)間宜適當(dāng)延長(zhǎng)。凝膠較薄，溫
度較高，則染色時(shí)間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近，在染色液中幾乎看不清凝膠時(shí)，
可以認(rèn)為已染色充分。染色2-4個(gè)小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間不會(huì)對(duì)最終的染色效果產(chǎn)生負(fù)面影響。
c. 倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
d. 加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液，確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
e. 置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)，室溫脫色4-24小時(shí)。期間更換脫色液2-4次，直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去，并
且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時(shí)后即可出現(xiàn)。
注：脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙，可以使部分染料吸附在吸水紙上，加快脫色。脫色時(shí)間過長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致蛋
白條帶的顏色變淺。
f．完成脫色后，可以把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保
存在含20%甘油的水中。長(zhǎng)期保存可以制備干膠。
2. 快速染色脫色方法：
a. 電泳結(jié)束后，取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。
通常對(duì)于膠濃度大于10％的膠比較堅(jiān)韌，在發(fā)生煮沸時(shí)不易破損；對(duì)于膠濃度小于10%的膠，宜盡量避免煮沸，以免出現(xiàn)
膠碎裂的情況。
b. 隨后在染色液溫度較高的情況下，在室溫?fù)u床上搖動(dòng)5-10分鐘。
c. 倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
d. 加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
e. 微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。
f. 隨后在脫色液溫度較高的情況下，在搖床上搖動(dòng)5-10分鐘。此時(shí)通常可以觀察到比較清楚的蛋白條帶。