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微生物檢測中的質譜技術

放大字體  縮小字體 發布日期:2023-07-31
核心提示: 提到“微生物質譜”,不妨把這一詞組拆開來看,“微生物”大家都懂,就不多說了,那么“質譜”到底是什么?小編帶大家來了
 提到“微生物質譜”,

不妨把這一詞組拆開來看,

“微生物”大家都懂,就不多說了,

那么“質譜”到底是什么?

小編帶大家來了解一下吧


 

微生物質譜到底是什么?

 

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質譜分析是一種通過測量離子質荷比(質量-電荷比),從而確定其質量的分析方法(通俗點講,質譜就是一種類型的“秤”,只不過它稱量的是離子的質量),在眾多的分析測試方法中被認為是一種同時具備高特異性和高靈敏度且得到了廣泛應用的普適性方法。

質譜儀器一般由進樣系統、離子源、質量分析器、檢測器、數據處理系統等部分組成。由于進樣方式、離子源、質量分析器等的不同,質譜儀分為不同的種類,臨床上常見的有液相色譜串聯質譜(LC-MS-MS)、氣相色譜串聯質譜(GC-MS-MS)、電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)、基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI-TOF MS)等等。

我們通常所提到的微生物質譜法采用的就是基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI-TOF MS)技術對微生物進行鑒定的方法,主要用于臨床分離出的細菌、真菌的快速鑒定。

 

圖片

 

質譜為什么能夠鑒定微生物?

 

 

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以細菌為例,MALDI-TOF MS之所以能夠對細菌進行鑒定,是因為細菌的核糖體蛋白具有保守性,一般不會隨生長條件的變化而變化,而不同細菌的核糖體蛋白指紋圖譜具有各異性,指紋圖譜中的某些峰具有屬、種,甚至亞種特異性。另外,同種細菌在同一培養條件下生長,所得到的質譜結果具有可重復性,這使得MALDI-TOF MS鑒定細菌結果更加準確。

基本原理是通過繪制具有保守特征的微生物核糖體蛋白離子峰圖譜并建立標準數據庫,隨后將臨床微生物的質譜數據通過復雜算法與數據庫中的標準譜進行對比,從而實現對微生物的準確鑒定,具有靈敏度高、準確度高、分辨率高、檢測速度快等特點。

目前主要應用于醫學臨床微生物、食品工業微生物、動植物檢疫微生物等的快速鑒定,還可用于核酸檢測、蛋白定量、質譜成像、生物大分子檢測以及聚合物分析等。

 


 

為什么要用質譜做微生物鑒定?

 

 

目前微生物鑒定常用的方法為生化原理檢測,即先判斷革蘭氏陰性還是陽性,再根據形態、酶反應、顯色等不同方法,將具體微生物種類鑒定出來。

對于絕大多數的微生物檢測有一個繞不開的環節,那就是標本處理和培養。需要首先對樣本進行預處理,根據涂片染色的結果選擇合適的培養基分離培養,然后根據菌落特點,選擇適當的生化反應或者自動儀器鑒定。

然而,生化法微生物檢測樣品培養時間長,短到幾小時,長到幾天都有可能;只能鑒定常規菌種,準確度一般;另外,就是鑒定流程較復雜,離不開人工干預,耗時長(十幾個小時甚至更長時間)。

由于鑒定原理的不同,微生物質譜法可大大簡化微生物的鑒定流程,縮短鑒定時間,上機之后,基本10min之內就可以鑒定出96個樣本,稱得上是一種微生物快速鑒定方法。

編輯:songjiajie2010

 
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