2 在空白出現(xiàn)菌落的時(shí)候需要去分析哪一步出現(xiàn)問題，人機(jī)料法環(huán)。當(dāng)然空白出現(xiàn)菌落的時(shí)候，那么該批次的菌落總數(shù)數(shù)據(jù)都作廢處理。在制樣和做樣的時(shí)候需要在百級(jí)的環(huán)境（百級(jí)的潔凈工作臺(tái)）下進(jìn)行。

3 稀釋液的均勻性，這個(gè)會(huì)影響結(jié)果，剛開始的時(shí)候可能會(huì)造成同一梯度的兩個(gè)結(jié)果相差有點(diǎn)遠(yuǎn)，這個(gè)是因?yàn)樽龅臅r(shí)候沒有把稀釋液均勻。如果前后兩個(gè)梯度沒有梯度性，那么就是在做稀釋做不好。這個(gè)都是靠多做，技術(shù)才會(huì)提高。（當(dāng)然還有一種情況，樣品是中添加了抑菌物質(zhì)，這樣沒有梯度性。）

1  可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位(colony-formingunits , CFU )表示。

2  選取菌落數(shù)在 30CFU~300CFU 之間、無蔓延菌落生長的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。低于 30CFU的平板記錄具體菌落數(shù)，大于 300CFU 的可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。

3  其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。（這個(gè)是很多新手會(huì)問的一個(gè)問題）

4  當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì)數(shù)。

1  若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每 g ( mL )樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。

2  若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按式( 1 )計(jì)算:

3  若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于 300CFU，則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，其他平板可記錄為多不可計(jì)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。

4  若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于 30CFU，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。

5  若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長，則以小于 1 乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。

6  若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在 30CFU~300CFU 之間，其中一部分小于 30CFU 或大于300CFU 時(shí)，則以最接近 30CFU 或 300CFU 的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。