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肉制品中亞硝酸鹽的測定

放大字體  縮小字體 發布日期:2010-09-01
核心提示:一、目的與要求:    1、明確亞硝酸鹽的測定與控制成品質量的關系。    2、明確與掌握鹽酸萘
一、目的與要求:

    1、明確亞硝酸鹽的測定與控制成品質量的關系。

    2、明確與掌握鹽酸萘乙二胺法的基本原理與操作方法。

    二、原理:

    樣品經沉淀蛋白質,除去脂肪后,在弱酸條件下硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化后,生成的重氮化合物,再與萘基鹽酸二氨乙烯偶聯成紫紅色的重氮染料,產生的顏色深淺與亞硝酸根含量成正比,可以比色測定。反應式如下:

三、試劑與儀器

1、亞鐵氰化鉀溶液:稱取106克亞鐵氰化鉀[K4Fe9(CN)5.3H2O],溶于水后,稀釋至1000毫升。

    2、乙酸鋅溶液:稱取220克乙酸鋅[Zn(CH2C00)2·2H20],加30毫升冰乙酸溶于水,并稀釋至1000毫升。

    3、飽和硼砂溶液:稱取5克硼酸鈉(Na2B07·10H20),溶于100毫升熱水中,冷卻后備用。

    4、0.4%對氨基苯磺酸溶液:稱取0.4克對氨基苯磺酸,溶于100毫升20%的鹽酸中,避光保存。

    5、0.2%鹽酸萘乙二胺溶液:稱取0.2克鹽酸萘乙二胺,溶于100毫升水中,避光保存。

    6、亞硝酸鈉標準溶液:精密稱取0.1000克于硅膠干燥器中干燥24小時的亞硝酸鈉,加水溶解移入500毫升容量瓶中,并稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于200微克亞硝酸鈉。

    7、亞硝酸鈉標準使用液:臨用前,吸取亞硝酸鈉標準溶液5.00毫升,置于200毫升容量瓶中,加水稀釋至刻度,此溶液每毫升相當于5微克亞硝酸鈉。

    8,小型絞肉機。

    9、分光光度計。

    四、操作方法:

    1、樣品處理:稱取5.0克經絞碎混勻的樣品,置于50毫升燒杯中,加工2.5毫升飽和溶液,攪拌均勻,以70℃左右的水約30毫升將樣品全部洗入500毫升容量瓶中,置沸水浴中加熱15分鐘,取出后冷至室溫,然后一面轉動一面加入5毫升亞鐵氰化鉀溶液,搖勻,再加入5毫升乙酸鋅溶液以沉淀蛋白質,加水至刻度,混勻,放置0.5小時,除去上層脂肪,清液用濾紙過濾棄去初濾液30毫升,濾液備用。

    2、測定

    吸取40毫升上述濾液于50毫升比色管中,另吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50毫升亞硝酸鈉標準使用液(相當于0、1、2、3、5、7、10、12.5微克亞硝酸鈉),分別置于50毫升比色管中,于標準與樣品管中分別加入2毫升0.4%對氨基苯磺酸溶液,混勻,靜置3-5分鐘后各加入1毫升0.2%鹽酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混勻,靜置15分鐘,用2厘米比色杯,以零管調節零點,于波長538nm處測吸光度,繪制標準曲線比較。

計算:  X=(A×1000)/(m×40/500×1000×1000)

X:樣品中亞硝酸鹽的含量,g/kg;

m:樣品質量,g;

A:測定用樣液中亞硝酸鹽的含量,ug.

編輯:foodyy

 
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