在线观看亚洲精品专区-在线观看亚洲免费-在线观看亚洲免费视频-在线观看亚洲欧美-欧美freexxx-欧美free嫩交video

VIP標(biāo)識(shí) 上網(wǎng)做生意,首選VIP會(huì)員| 設(shè)為首頁(yè)| 加入桌面| | 手機(jī)版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)
 

斑點(diǎn)雜交

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
斑點(diǎn)雜交(Dot blot)是將被檢標(biāo)本點(diǎn)到膜上,烘烤固定。這種方法耗時(shí)短,可做半定量分析。一張膜上可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品,為使點(diǎn)樣準(zhǔn)確方便,市售有多種多管吸印儀(Manifold),如MinifoldⅠ和Ⅱ、Bio-Dot(Bio-Rad)和Hybri-Dot,它們有許多孔,樣品加到孔中,在負(fù)壓下就會(huì)流到膜上呈斑點(diǎn)狀或狹縫狀。反復(fù)沖洗進(jìn)樣孔,取出膜烤干或紫外線照射以固定標(biāo)本,這時(shí)的膜就可以進(jìn)行雜交。
(1)DNA斑點(diǎn)雜交:
①先將膜在水中浸濕,再放到15×SSC中。
②將DNA樣品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。
③用鉛筆在濾膜上標(biāo)好位置,將DNA點(diǎn)樣于膜上,每個(gè)樣品一般點(diǎn)5μl(2~10μg DNA)。
④將膜烘干,密封保存?zhèn)溆谩?
(2)RNA斑點(diǎn)雜交:與上法類似,每個(gè)樣品至多加10μg總RNA(經(jīng)酚/氯仿或異硫氰酸胍提取純化),方法是將RNA溶于5μl
DEPC水,加5μl甲醛/SSC緩沖液(10×SSC中含6.15mol/L甲醛),使RNA變性,然后取5-8μl點(diǎn)樣于處理好的濾膜上,烘干。
(3)完整細(xì)胞斑點(diǎn)雜交:應(yīng)用類似檢測(cè)細(xì)菌菌落的方法,可以對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物的特異序列進(jìn)行快速檢測(cè),將整個(gè)細(xì)胞點(diǎn)到膜上,經(jīng)NaOH處理,使DNA暴露、變性和固定,再按常規(guī)方法進(jìn)行雜交與檢測(cè)。有人曾用此法從105個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞中檢測(cè)到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整細(xì)胞斑點(diǎn)印跡法可以用于篩選大量標(biāo)本,因?yàn)樗辜?xì)胞直接在膜上溶解,所以DNA含量甚至比常用的提取法還高,又不影響與32P標(biāo)記的探針雜交,但它不適用于非放射性標(biāo)記探針,因?yàn)镈NA純度不夠,會(huì)產(chǎn)生高本底。
 
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關(guān)閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點(diǎn)擊排行
 
 
Processed in 0.164 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 国产一级特黄aa大片爽爽 | 黄色三级录像 | 久久99久久99精品免观看 | 国产免费成人在线视频 | 成人午夜剧场 | 啪啪午夜 | 久久综合九色婷婷97 | 国产成人亚洲影视在线 | 你懂的网站在线观看 | 日本三级黄视频 | 久色乳综合思思在线视频 | a免费在线 | 亚洲欧美日韩特级毛片 | 在线免费观看h视频 | 特黄aa级毛片免费视频播放 | 亚洲免费色视频 | 天天免费 | 欧美激情αv一区二区三区 欧美激情第一欧美在线 | 中文字幕亚洲一区二区三区 | 激情五月婷婷色 | 91网站免费在线观看 | 国内自拍 亚洲系列 欧美系列 | www一区二区三区 | 五月婷婷色播 | 伊人不卡久久大香线蕉综合影院 | 啪啪91视频 | 国产又黄又爽又猛的免费视频播放 | 青青热久久国产久精品秒播 | 一个人看的www片免费高清视频 | 亚洲一区毛片 | 五月婷婷色网 | 欧美四虎影院 | 午夜h| 色视频在线| 天天槽任我槽免费 | 久青草久青草高清在线播放 | 天天操天天操天天操香蕉 | 国产69精品久久久久9999 | 国产99久久九九精品免费 | 色爱区综合激月婷婷激情五月 | 性欧美69 |