91小视频在线观看-91小视频在线观看-91小视频-91小视频-欧美成人免费视频-欧美成人免费电影

VIP標(biāo)識 上網(wǎng)做生意,首選VIP會員| 設(shè)為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號
 

基因轉(zhuǎn)染技術(shù)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
常用的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)是將外源基因?qū)氚屑毎枰欢ǖ妮d體和導(dǎo)入方法,基因轉(zhuǎn)技術(shù)則是將純化的含有靶基因的質(zhì)粒DNA送入細胞內(nèi),并在細胞內(nèi)表達。轉(zhuǎn)染方法有多種,根據(jù)不同的細胞,貼壁或懸浮細所可選用不同的方法,其目的是要達到設(shè)置轉(zhuǎn)染效率,影響轉(zhuǎn)染產(chǎn)率的因素有多種,包括轉(zhuǎn)染方法、操作技術(shù)、質(zhì)粒DNA的純度、靶細胞的生長狀態(tài)等,下面重點介紹向幾種常用的轉(zhuǎn)染技術(shù):
被用于作靶基因轉(zhuǎn)染的細胞,其生長狀態(tài)如何,將直接決定了基因轉(zhuǎn)染效率。如為貼壁生長的細胞,一般要求在轉(zhuǎn)染前一日,必需應(yīng)用胰酶處理成單細胞懸液,重新接種于培養(yǎng)皿或瓶,細胞密度以鋪滿培養(yǎng)器皿的60%為宜,轉(zhuǎn)染當(dāng)日,在轉(zhuǎn)染前4小時換一將近新鮮培養(yǎng)液。對于懸浮細胞,也需在轉(zhuǎn)染前4小時換一次新鮮培養(yǎng)液。
用于轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒DNA必須無蛋白質(zhì),無RNA和其了化學(xué)物質(zhì)的污染,OD260/280比值應(yīng)在1.8以上。應(yīng)用酚-氯仿抽提法制備的質(zhì)粒DNA一般難以達到此標(biāo)準(zhǔn),目前大多采用進口的術(shù)提取純化試劑盒。
具體的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)有鱗酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染法、DEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法及電擊基因轉(zhuǎn)導(dǎo)塵等。靶基因被導(dǎo)入細胞后,一般在轉(zhuǎn)染后48小時,靶基因即在細胞內(nèi)表達。根據(jù)不同的實驗?zāi)康模?8小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。如若建立穩(wěn)定的細胞系,則可對靶細胞進行篩選,根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物,最常用的直核表達基因載體的標(biāo)志物有潮霉素(hygromycin)和新霉素(neomycin)。
 
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關(guān)閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.156 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 欧美色88 | 成人美女隐私免费 | 在线观看精品国产福利片100 | avhd101天天看新片 | 在线观看永久免费视频网站 | 在线永久免费观看黄网站 | 欧美黄色录像视频 | 美女张开腿让男生桶出水 | 欧美亚洲韩国国产综合五月天 | 色狠狠色综合久久8狠狠色 色狠狠网 | 久久久久九九精品影院 | 网站大全黄免费 | 亚洲第一区精品日韩在线播放 | 久久精品最新免费国产成人 | 国产h视频在线观看高清 | 亚洲第一免费视频 | 2021精品综合久久久久 | 8888四色奇米在线观看不卡 | 在线成人免费观看国产精品 | 亚洲天堂免费在线 | 亚洲国产系列 | 一级毛片在线免费视频 | 操日韩 | 中文网丁香综合网 | 综合视频网 | 日本三级香港三级人妇99 | 男人你懂的网站 | 亚洲最色网站 | 五月婷婷天| 全色网站 | 1024你懂的在线播放欧日韩 | 久久香蕉国产线看观看亚洲片 | 伊人天天干 | 美女扒开尿口给男人桶 | 性欧美一区 | 伊人网在线视频 | 午夜视频网| 青草悠悠视频在线观看 | 午夜a视频 | 热久久最新视频 | 天堂成人网 |