1.儀器裝置 通常由穩(wěn)流電泳儀和圓盤或平板電泳槽組成。其電泳室有上、下兩槽,每個(gè)槽中都有固定的鉑電極，鉑電極經(jīng)隔離電線接于電泳儀穩(wěn)流擋上。

2.試劑
(1)溶液A 取三羥甲基氨基甲烷36.6g，四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L鹽酸溶液48ml，再加水溶解并稀釋至100ml,置棕色瓶內(nèi)，在冰箱中保存。
(2)溶液B 取丙烯酰胺30.0g、次甲基雙丙烯酰胺0.74g，加水溶解并稀釋至100ml,濾過，置棕色瓶內(nèi)，在冰箱中保存。
(3)電極緩沖液(pH8.3) 取三羥甲基氨基甲烷6g、甘氨酸28.8g,加水溶解并稀釋至1000ml，置冰箱中保存，用前稀釋10倍。
(4)溴酚藍(lán)指示液 取溴酚藍(lán)0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.0ml與90％乙醇5ml,微熱使溶解，加20％乙醇制成250ml。
(5)染色液 取0.25％(W/V)考馬斯亮藍(lán)G<[250]>溶液2.5ml，加12.5％(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。
(6)稀染色液 取上述染色液2ml，加12.5％(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。
(7)脫色液 7％醋酸溶液。

3.操作
(1)制膠 取溶液A2ml，溶液B5.4ml，加尿素2.9g使溶解，再加水4ml，混勻，抽氣趕去溶液中氣泡， 加0.56％過硫酸銨溶液2ml，混勻制成膠液，立即用裝有長針頭的注射器或細(xì)滴管將膠液沿管壁加至底端有橡皮塞的小玻璃管(10×0.5cm)中,使膠層高度達(dá)6～7cm, 然后徐徐滴加水少量，使覆蓋膠面，管底氣泡必須趕走，靜置約30分鐘，待出現(xiàn)明顯界面時(shí)即聚合完畢，吸去水層。
(2)標(biāo)準(zhǔn)品溶液及供試品溶液的制備
(3)電泳 將已制好的凝膠玻璃管裝入圓盤電泳槽內(nèi)，每管加供試品或標(biāo)準(zhǔn)品溶液50～100μl，為防止擴(kuò)散可加甘油或40％蔗糖溶液1～2滴及0.04％溴酚藍(lán)指示液1滴,也可直接在上槽緩沖液中加0.04％溴酚藍(lán)指示液數(shù)滴，玻璃管的上部用電極緩沖液充滿，上端接負(fù)極、下端接正極。調(diào)節(jié)起始電流使每管為1mA，數(shù)分鐘后，加大電流使每管為2～3mA，當(dāng)溴酚藍(lán)指示液移至距玻璃管底部1cm處，關(guān)閉電源。
(4)染色和脫色 電泳完畢，用裝有長針頭并吸滿水的注射器,自膠管底部沿膠管壁將水壓入，膠條即從管內(nèi)滑出，將膠條浸入稀染色液過夜或用染色液浸泡10～30分鐘，以水漂洗干凈，再用脫色液脫色至無蛋白區(qū)帶凝膠的底色透明為止。
(5)結(jié)果判斷 將膠條置燈下觀察，根據(jù)供試品與標(biāo)準(zhǔn)品的色帶位置和色澤深淺程度進(jìn)行判斷。 相對(duì)遷移率 供試品和標(biāo)準(zhǔn)品的電泳區(qū)帶有時(shí)可用相對(duì)遷移率(R'<[m]>)進(jìn)行比較。