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免疫細(xì)胞化學(xué)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06

免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)是根據(jù)免疫學(xué)原理,利用抗體同特定抗原專一結(jié)合,對(duì)抗原進(jìn)行定位測(cè)定的技術(shù)。抗原主要為大分子或與大分子相結(jié)合的小分子;抗體則是由漿細(xì)胞針對(duì)特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結(jié)合上標(biāo)記物,再與組織中的抗原發(fā)生反應(yīng),即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。

常用的標(biāo)記物有熒光素和酶。熒光素標(biāo)記的稱為免疫熒光法(immunofluorescent technique)常用的螢光素有異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate)、羅丹明(rhodamine)等。酶標(biāo)記的稱為酶標(biāo)免疫法(enzyme-labeled antibody method),常用的酶有辣根過(guò)氧化物酶(horseradish peroxidase),酶與底物發(fā)生反應(yīng)后形成不透明的沉積物,從而顯示出抗原存在的部位。

抗體與抗原的結(jié)合方法可分為直接法和間接法兩種,直接法是將帶有標(biāo)記的抗體與抗原反應(yīng),顯示出抗原存在的部位。而間接法則是在抗體抗原初級(jí)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,再用帶標(biāo)記的次級(jí)抗體同初級(jí)抗體反應(yīng),從而使初級(jí)反應(yīng)得到放大,顯示增強(qiáng)。

 
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