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微生物接種培養的最全解讀,最后幾條很重要!

放大字體  縮小字體 發布日期:2024-05-17
核心提示:一、常見培養基及其臨床應用【A】血平板:即血瓊脂平板培養基,主要成分包括脫脂羊血、蛋白胨、牛肉粉、氯化鈉。羊血一方面提供一
一、常見培養基及其臨床應用

【A】血平板:即血瓊脂平板培養基,主要成分包括脫脂羊血、蛋白胨、牛肉粉、氯化鈉。羊血一方面提供一些特殊生長因子,另一方面用于溶血反應的觀察。

【B】麥康凱平板:麥康凱瓊脂培養基簡稱MAC培養基。主要成分包括蛋白胨、膽鹽、氯化鈉、乳糖、中性紅,MAC為一種選擇性培養基其原理是:膽鹽可以抑制革蘭氏陽性菌的生長,對傷寒等沙門菌的生長有促進作用。中性紅可以把能分解乳糖和不分解乳糖的細菌區分開,而呈現不同顏色。沙門菌及志賀菌呈無色菌落,大腸埃希菌呈桃紅色菌落。不過麥康凱瓊脂為一種弱選擇性的培養基,一些其他的細菌也能在上面生長。

【C】不加萬古霉素巧克力平板:主要成分包括哥倫比亞血瓊脂、無菌羊血。當培養基加熱至80-90℃時,可使紅細胞破裂,以利于嗜血桿菌、奈瑟菌的生長。

【C+】加萬古霉素巧克力平板:巧克力平板基礎上添加萬古霉素,可抑制絕大部分革蘭陽性球菌。

【D】沙保弱平板:主要成分包括蛋白胨、葡萄糖、瓊脂粉、氯霉素。真菌對培養基營養要求不高,在高濃度葡萄糖、麥芽糖、淀粉和酸性條件下即可生長繁殖。

淋球菌平板:主要組成成分包括特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、磷酸氫二鉀、磷酸氫鉀、瓊脂。

堿性蛋白胨水:主要成分為蛋白胨、氯化鈉。蛋白胨提供碳氮源,較高的pH抑制腸道菌群生長,利于霍亂弧菌的生長,高濃度氯化鈉滿足弧菌嗜鹽生長的需要。

SS平板:主要成分為牛肉粉、蛋白胨、乳糖、膽鹽、檸檬酸鈉、硫代硫酸鐵、檸檬酸鐵、煌綠、苯酚紅。

羅氏固體培養基:主要成分包括蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機鹽和孔雀綠等。孔雀綠可抑制雜菌生長,蛋黃含脂質生長因子,能刺激生長。
 

二、如何選擇培養基


三、如何接種標本

四、如何選擇培養條件


五、關于接種培養的常見問題


Q:送過培養組合(一般細菌+真菌培養),能延長時間進行結核桿菌培養嗎?

A:不能。一般細菌培養+真菌培養僅接種常規的血平板麥康凱巧克力等培養基+沙保弱培養基,結核分枝桿菌需要專門的羅氏固體培養基或分枝桿菌液體培養基,雖然二者培養溫度相同,但營養條件不同,即使延長培養時間,也無法保證結核分枝桿菌的生長。

Q:尿培養能用尿常規管送檢嗎?大便培養能用大便常規管送檢嗎?

A:不能。所有培養標本應使用無菌容器以避免細菌污染,尿培養或大便培養應使用專用的無菌痰杯或無菌拭子送檢。

Q:經過PCR檢測使用后的標本,能拿來做培養嗎?

A:不能。建議1份標本貼1個條碼,如標本量少或實在難以取材需要共用標本,應優先進行微生物培養。因經過其他項目檢測處理后的樣本可能會被污染或將原有的細菌/真菌滅活,導致培養結果的假陽性或假陰性。且實驗室標本應保存一段時間以備復查,共用標本后可能導致標本無法復查,建議盡量不要共用標本。

Q:為什么送檢培養組合(一般細菌+真菌培養)一定要備注標本類型?

A:雖然培養目的相同(一般細菌+真菌),但不同標本類型對應接種的培養基、培養技術不同,且不同標本類型(如無菌部位VS有菌部位)在培養基上生長結果的解讀不同,導致無法進行接種或結果報告。


參考文獻:
[1] WS/T 805—2022臨床微生物檢驗基本技術標準
[2] WS/T 497—2017侵襲性真菌病臨床實驗室診斷操作指南
本文結合了相關行業標準及本實驗室操作規范。 
編輯:songjiajie2010

 
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