建立CO₂培養(yǎng)箱的使用與維修保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保操作人員正確使用。

2 范圍

    適用于CO₂培養(yǎng)箱的操作及維護(hù)保養(yǎng)。

3 定義

    CO₂培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境，培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度（37°C）、穩(wěn)定的CO₂水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對飽和濕度（95%），來對細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置，是細(xì)胞、組織、細(xì)菌培養(yǎng)的一種先進(jìn)儀器，是開展免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)及生物工程所必須的關(guān)鍵設(shè)備。

4職責(zé)

設(shè)備使用人員執(zhí)行本SOP。

5 程序

5.1 儀器結(jié)構(gòu)

    二氧化碳培養(yǎng)性由二氧化碳鋼瓶和箱體組成。

5.2 使用操作規(guī)程    

5.2.1 準(zhǔn)備

(1)二氧化碳鋼瓶出壓變低時(shí)，提前采購，準(zhǔn)備好備用品。

(2)每兩周準(zhǔn)備2-3L滅菌水或飽和硫酸銅溶液。

5.2.2 操作

(1) 確認(rèn)儀器設(shè)備處于正確的安裝狀態(tài),確認(rèn)電源、二氧化碳?xì)怏w等連接正確。打開CO₂供氣閥；注意CO₂供氣必須是從減壓閥輸出，且壓力維持在0.5～1bar，不能超過1bar。

(2)啟動(dòng)程序

    啟動(dòng)前應(yīng)打開電源開關(guān)，設(shè)置工作參數(shù)。（注意：新開啟的培養(yǎng)箱壓力傳感開關(guān)在接通電源后2～3小時(shí)方能正常工作！）。

(3)運(yùn)行程序,設(shè)置工作參數(shù)，按照實(shí)驗(yàn)要求的氣體數(shù)值和溫度，如37℃，5% CO₂，穩(wěn)定后即可放入樣品。

(4)運(yùn)行設(shè)定程序。

5.3 清潔操作規(guī)程

5.3.1 每個(gè)月用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)不銹鋼隔板和內(nèi)膽，用手持紫外燈照射1小時(shí)。

5.4 維護(hù)保養(yǎng)操作規(guī)程

5.4.1 機(jī)器表面應(yīng)經(jīng)常清潔，保持干凈。

5.4.2 不用時(shí)，關(guān)閉程序，關(guān)閉氣瓶，關(guān)閉電源。長期不用時(shí)應(yīng)拔下電源插頭。

5.4.3 箱體和附件清潔/滅菌（每月1次）。

5.4.4 用純化水擦拭所有附件，用無紡布或紙擦干，再用75%的酒精噴灑消毒后擦干，確保內(nèi)膽角落和頂部經(jīng)過同樣處理，再用手持紫外燈照射一小時(shí)。

5.4.5增濕盤換水或者飽和硫酸銅溶液（2周1次）。

5.5 填寫記錄

及時(shí)填寫CO₂培養(yǎng)箱溫度、CO₂濃度記錄。

5.6 注意事項(xiàng)

5.6.1長期不用時(shí)關(guān)閉培養(yǎng)箱，應(yīng)拔下電源插頭，將托盤中的水或者飽和硫酸銅溶液倒出，清潔腔體，待干燥后再關(guān)門。

5.6.2 平時(shí)取送培養(yǎng)物時(shí)應(yīng)盡量避免開門過大，盡量避免培養(yǎng)箱門被頻繁開關(guān)，以免CO₂濃度、溫度、相對濕度發(fā)生較大波動(dòng)。